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動物源性食品中的敵百蟲、敵敵畏與蠅毒磷樣品前處理方法

點擊次數：2169 更新時間2021-07-16 【關閉】

敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷均屬於(yu) 有機磷農(nong) 藥，作為(wei) 一種殺蟲劑，有機磷農(nong) 藥具有廣譜、高效、低毒、使用方便等特點，廣泛應用於(yu) 農(nong) 業(ye) 、畜牧業(ye) 、水產(chan) 、林業(ye) 等方麵的防蟲或殺蟲工作。有機磷農(nong) 藥的廣泛使用，在給人們(men) 增加利益的同時也給環境造成了嚴(yan) 重的汙染。大量食用含有敵百蟲等農(nong) 藥殘留的食物會(hui) 導致機體(ti) 正常生理功能的失調，引起病理改變和毒性危害。因此，為(wei) 保障動物源性食品的安全，我國農(nong) 業(ye) 農(nong) 村部和國家市場監督管理總局2019年發布的GB 31650-2019《食品安全國家標準食品中獸(shou) 藥最大殘留*》中明確規定了敵百蟲和敵敵畏在牛和豬靶組織中的殘留*。

本文闡述了如何將敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷從(cong) 樣品基質中分離提取出來，並經過淨化後，轉化成液質聯用儀(yi) 可以檢測的形式。以提取、淨化為(wei) 重點，依據國標GB 23200.94-2016，為(wei) 檢測人員和相關(guan) 領域研究人員提供一定的參考。

檢測項目：敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷

應用範圍：畜、禽分割肉、鹽漬腸衣和蜂蜜

液相色譜-質譜/質譜法

方法原理：試樣中的敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷用二氯甲烷或乙酸乙酯提取，提取液經濃縮、脫脂後，用液相色譜-質譜/質譜儀(yi) 測定，外標峰麵積法定量，子離子豐(feng) 度比定性。

前處理儀(yi) 器：

分析天平（感量0.01 g 和0.0001 g）；超聲波清洗器；旋渦混勻器；旋轉蒸發儀(yi) ；離心機（5000 r/min）；均質器；0.45 μm微孔濾膜。

檢測儀(yi) 器：UHPLC-MS/MS+ESI源

試樣的製備與(yu) 保存

1. 分割肉

取樣品中有代表性的約500 g，用組織搗碎機搗碎，裝入潔淨容器作為(wei) 試樣，密封並做好標識。

2. 腸衣

取有代表性樣品約100 g，用剪刀剪碎至2 毫米以下，裝入潔淨容器作為(wei) 試樣，密封並做好標識。

3. 蜂蜜

取有代表性樣品約500 g，攪拌均勻後裝入潔淨容器內(nei) 密封並做好標識。

試樣保存與(yu) 製樣要求：分割肉、腸衣、蜂蜜等試樣於(yu) 零下18 ℃ 以下冷凍保存。在製樣的操作過程中，應防止樣品受到汙染或發生殘留物含量的變化。

前處理方法

1.分割肉

準確稱取5 g均勻試樣（精確至0.01 g）於(yu) 50 mL具塞離心管中，加入5 g無水硫酸鈉混勻，再加入15 mL二氯甲烷，用均質器（10000 r/min）均質2 min，4000 r/min離心3 min，將有機相轉移至100 mL梨形蒸餾瓶中，殘渣再用2×10 mL二氯甲烷均質提取兩(liang) 次。離心合並有機相，於(yu) 40 ℃旋轉蒸發至2 mL，將樣液轉移至5 mL刻度試管中，並用少量二氯甲烷洗滌梨形蒸餾瓶，合並洗滌液到刻度試管中，室溫通氮濃縮至幹。定量加入1.0 mL乙腈溶解殘渣，加入2 mL環己烷旋渦混勻2 min後，2500 r/min離心3 min，將下層乙腈相過0.45 μm微孔濾膜後，供液相色譜-質譜/質譜儀(yi) 測定。

2.腸衣

準確稱取5 g試樣（精確至0.01 g）於(yu) 50 mL具塞離心管中，加入2 g無水硫酸鈉混勻，再加入15 mL二氯甲烷，蓋上蓋混勻，置於(yu) 超聲波清洗器中超聲30 min，冷卻後將有機相過濾轉移至100 mL梨形蒸餾瓶中，殘渣再用2×10 mL二氯甲烷混勻超聲提取兩(liang) 次，離心合並有機相，於(yu) 40 ℃旋轉蒸發至2 mL，將樣液轉移至5 mL刻度試管中，並用少量二氯甲烷洗滌梨形蒸餾瓶，合並洗滌液到刻度試管中，室溫通氮濃縮至幹。定量加入1.0 mL乙腈溶解殘渣，加入2 mL環己烷旋渦混勻2 min後，2500 r/min離心3 min，將下層乙腈相過0.45 μm微孔濾膜後，供液相色譜-質譜/質譜儀(yi) 測定。

3.蜂蜜

稱取5 g試樣（精確至0.01 g）於(yu) 50 mL具塞離心管中，加入10 mL水和25 mL乙酸乙酯，於(yu) 旋渦混合器上混勻1 min，以3000 r/min離心5 min，將上層乙酸乙酯提取液收集於(yu) 濃縮瓶中，殘渣再加入20 mL乙酸乙酯，重複上述操作，合並乙酸乙酯提取溶液。在50 ℃ 以下減壓濃縮至約3 mL後轉移至10 mL離心管中，用5 mL乙酸乙酯分兩(liang) 次洗滌濃縮瓶，合並洗滌液於(yu) 離心管中，用氮氣吹幹。加1.0 mL乙腈溶解殘渣，並過0.45 μm微孔濾膜後，供液相色譜-質譜/質譜儀(yi) 測定。

國標解讀&

注意事項

1.標準物質用甲醇配成100 μg/mL的標準儲(chu) 備液，在0 ℃～4 ℃冷藏避光保存，可使用3個(ge) 月。

2.本方法中肉類和腸衣的提取淨化方式為(wei) ：二氯甲烷提取三次，無水硫酸鈉除水，環己烷除脂；蜂蜜的的提取淨化方式為(wei) ：水溶解後，乙酸乙酯提取兩(liang) 次。三種基質均相當於(yu) 5 g試料上機檢測。

3.根據基質中含水量的多少，調整無水硫酸鈉的用量。

4.本方法采用多次提取的方式提高目標化合物的回收率。

5.本方法使用基質曲線進行定量，還可以使用三種化合物相對應的同位素內(nei) 標配製標準曲線，進行回收率的校正。

”

參考文獻

GB 23200.94-2016 食品安全國家標準動物源性食品中敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷殘留量的測定液相色譜-質譜/質譜法

圖1 分割肉中敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷殘留量測定的前處理流程圖

圖2 腸衣中敵百蟲、敵敵畏與(yu) 蠅毒磷殘留量測定的前處理流程圖