阿苯達唑的危害及檢測目的

阿苯達唑（ABZ）又名丙硫咪唑，是苯並咪唑類驅蟲藥物，因其治療效果好、毒性小等方麵的優(you) 勢，被廣泛用於(yu) 治療動物的腸道寄生蟲感染病，是目前獸(shou) 醫臨(lin) 床使用*泛藥物之一。阿苯達唑進入動物體(ti) 內(nei) 後會(hui) 快速代謝為(wei) 阿苯達唑亞(ya) 碸（ABZSO），阿苯達唑亞(ya) 碸進一步轉化為(wei) 阿苯達唑碸（ABZSO2），最終代謝為(wei) 2-氨基阿苯達唑碸（ABZSO2-2-NH2）。因此，為(wei) 監控阿苯達唑藥物的使用情況，保障動物源性食品的安全，我國農(nong) 業(ye) 農(nong) 村部和國家市場監督管理總局2019年發布的GB 31650-2019《食品安全國家標準食品中獸(shou) 藥最大殘留*》中明確規定了阿苯達唑在所有食品動物靶組織中的殘留標誌物及殘留*。

本文闡述了如何將阿苯達唑及其代謝物從(cong) 樣品基質中分離提取出來，並經過淨化後，轉化成高效液相色譜儀(yi) 可以檢測的形式。以提取、淨化為(wei) 重點，依據國標GB 29687-2013，為(wei) 檢測人員和相關(guan) 領域研究人員提供一定的參考。

檢測項目：阿苯達唑、阿苯達唑亞(ya) 碸、阿苯達唑碸、2-氨基阿苯達唑碸

應用範圍：水產(chan) 品（蝦、蟹、魚）

高效液相色譜法

方法原理：試料中殘留的阿苯達唑及代謝物，用乙酸乙酯提取，正己烷除脂，乙酸乙酯反萃取，高效液相色譜-熒光檢測器測定，外標法定量。

前處理儀(yi) 器： 

分析天平（感量0.01 g 和0.00001 g）；均質機；離心機；旋轉蒸發器；氮吹儀(yi) ；梨形瓶（100mL）；濾膜（有機相0.45 μm）。

檢測儀(yi) 器：HPLC-FLD

試樣的製備與(yu) 保存

取適量新鮮或冷凍的魚，去鱗、去皮，沿脊背取肌肉；蝦，去頭、去殼，取肌肉部分。絞碎，並使均質。

取均質後的供試樣品，作為(wei) 供試試料。

取均質後的空白樣品，作為(wei) 空白試料。

取均質後的空白樣品，添加適宜濃度的標準工作液，作為(wei) 空白添加試料。

試料於(yu) 零下20 ℃ 以下保存。

前處理方法

提取：稱取試料2 g±0.02 g，於(yu) 50 mL離心管中，加乙酸乙酯15 mL，均質30 s，振蕩5 min，4000 r/min離心10 min，取上清液於(yu) 100 mL梨形瓶中，殘渣備用。另取一50 mL離心管，加乙酸乙酯15 mL，清洗均質機30 s，洗滌液於(yu) 殘渣中，振蕩5 min，4000 r/min離心10 min，上清液合並至100 mL梨形瓶中，於(yu) 35 ℃旋轉蒸發至幹，用20 %甲醇溶液1.0 mL溶解殘渣。

除脂：將上述溶液移入10 mL離心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1 mL，洗滌，正己烷轉入離心管中，振蕩1 min，4000 r/min離心5 min，棄正己烷層液，再加入正己烷1 mL，重複操作兩(liang) 次，取下層液備用。

淨化：備用液中加0.04 mol/L磷酸1 mL，混勻，加二氯甲烷1.5 mL，混合1 min，4000 r/min離心5 min，取二氯甲烷液於(yu) 10 mL離心管中，再加二氯甲烷1.5 mL，重複提取兩(liang) 次，合並三次二氯甲烷液於(yu) 10 mL離心管中，於(yu) 35 ℃氮氣吹幹；用0.02 mol/L磷酸氫二鈉溶液1.0 mL溶解殘餘(yu) 物，加乙酸乙酯2 mL，混合1 min，4000 r/min離心5 min，將乙酸乙酯液移入另一10 mL離心管中，再向磷酸氫二鈉溶液中加乙酸乙酯2 mL，重複提取兩(liang) 次，合並三次乙酸乙酯液，於(yu) 40 ℃氮氣吹幹，用20 %甲醇-水1.0 mL溶解殘留物，濾膜過濾，供液相色譜測定。

提取：稱取試料2 g±0.02 g，於(yu) 50 mL離心管中，加乙酸乙酯15 mL，均質30 s，振蕩5 min，4000 r/min離心10 min，取上清液於(yu) 100 mL梨形瓶中，殘渣備用。另取一50 mL離心管，加乙酸乙酯15 mL，清洗均質機30 s，將此液倒入上述殘渣中振蕩提取5 min，4000 r/min離心10 min，上清液合並至100 mL梨形瓶中，於(yu) 35 ℃減壓旋轉蒸發至幹，加入20 %甲醇溶液1.0 mL溶解殘渣。

除脂：將上述溶液移入10 mL離心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1 mL，洗滌，正己烷轉入離心管中，振蕩1 min，4000 r/min離心5 min，去除正己烷層，再加入正己烷1 mL，依法重複操作兩(liang) 次。下層溶液過0.45 μm有機相濾膜，供液相色譜測定。